La vacuna conjugada de SARS-CoV-2 RBD-toxoide tetánico induce una fuerte inmunidad neutralizante en estudios preclínicos

El esfuerzo por desarrollar vacunas basadas en plataformas tecnológicas económicamente accesibles disponibles por los fabricantes de vacunas de los países en desarrollo es esencial para extender la inmunización a toda la población mundial y lograr la inmunidad colectiva deseada, necesaria para poner fin a la pandemia de COVID-19.

En este trabajo de autores cubanos, publicado el pasado 3 de julio en el repositorio de preprints medRxiv, se informa sobre el desarrollo de una proteína del dominio de unión al receptor (RBD) del SARS-CoV-2, expresada en la levadura Pichia pastoris. El RBD se modificó con la adición de extensiones de aminoácidos N- y C-terminales flexibles destinadas a modular las interacciones proteína / proteína y facilitar la purificación de proteínas. La fermentación con medio de cultivo de extracto de levadura produjo 30-40 mg / L. Después de la purificación mediante cromatografía de afinidad de iones metálicos inmovilizados y cromatografía de interacción hidrófoba, la proteína RBD se caracterizó por espectrometría de masas, dicroísmo circular y afinidad de unión al receptor de la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2).

La proteína recombinante muestra una alta antigenicidad con sueros humanos convalecientes y también con sueros de individuos vacunados con las vacunas adenovirales ARNm (Pfizer-BioNTech) o  Sputnik V. La proteína RBD estimula IFNγ, IL-2, IL-6, IL-4 y TNFα en ratones que secretan esplenocitos de PBMC y células enriquecidas en CD3 + de pulmón. Los estudios de inmunogenicidad con 50 µg del RBD recombinante formulado con alumbre, inducen altos niveles de anticuerpos de unión en ratones y primates no humanos, evaluados mediante placas ELISA cubiertas con proteína RBD expresada en células HEK293T. Los sueros de ratón inhibieron la unión de RBD al receptor ACE2 en una prueba in vitro y muestran la neutralización de la infección por SARS-CoV-2 de las células Vero E6.

Estos datos sugieren que la proteína recombinante RBD expresada en la levadura P. pastoris es adecuada como candidata a vacuna contra la COVID-19.

Vea el artículo en:  Limonta-Fernández M, Chinea-Santiago G, Martín-Dunn AM, Gonzalez-Roche D,  Bequet-Romero M, Marquez-Perera G,  etl. The SARS-CoV-2 receptor-binding domain expressed in Pichia pastoris as a candidate vaccine antigen. medRxiv 2021.06.29.21259605; doi: https://doi.org/10.1101/2021.06.29.21259605.